光合色素的提取和分离（光合色素）

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1、光合色素的荧光现象叶绿素溶液在透射光下呈绿色，而在反射光下呈红色，这种现象称为叶绿素荧光现象。

2、叶绿素为什么会发荧光呢?当叶绿素分子吸收光量子后，就由最稳定的、能量的最低状态-基态(ground state)上升到不稳定的高能状态-激发态(excited state)(图3-3)。

3、叶绿素分子有红光和蓝光两个最强吸收区。

4、如果叶绿素分子被蓝光激发，电子跃迁到能量较高的第二单线态;如果被红光激发，电子跃迁到能量较低的第一单线态。

5、处于单线态的电子，其自旋方向保持原来状态，如果电子在激发或退激过程中自旋方向发生变化，该电子就进入能级较单线态低的三线态。

6、由于激发态不稳定，迅速向较低能级chl + h ----→chl* (3-6)基态 光子能量 激发态状态转变，能量有的以热的形式释放，有的以光的形式消耗。

7、从第一单线态回到基态所发射的光就称为荧光。

8、处在第一三线态的叶绿素分子回到基态时所发出的光为磷光。

9、荧光的寿命很短，只有10-8~10-10s。

10、由于叶绿素分子吸收的光能有一部分消耗于分子内部的振动上，发射出的荧光的波长总是比被吸收的波长要长一些。

11、所以叶绿素溶液在入射光下呈绿色，而在反射光下呈红色。

12、在叶片或叶绿体中发射荧光很弱，肉眼难以观测出来，耗能很少，一般不超过吸收能量的5%，因为大部分能量用于光合作用。

13、色素溶液则不同，由于溶液中缺少能量受体或电子受体，在照光时色素会发射很强的荧光。

14、另外，吸收蓝光后处于第二单线态的叶绿素分子，其贮存的能量虽远大于吸收红光处于第一单线态的状态，但超过的部分对光合作用是无用的，在极短的时间内叶绿素分子要从第二单线态返回第一单线态，多余的能量也是以热的形式耗散。

15、因此，蓝光对光合作用而言，在能量利用率上不如红光高。

16、叶绿素的荧光和磷光现象都说明叶绿素能被光所激发，而叶绿素分子的激发是将光能转变为化学能的第一步。

17、现在，人们用叶绿素荧光仪能精确测量叶片发出的荧光，而荧光的变化可以反映光合机构的状况，因此，叶绿素荧光被称为光合作用的探针。

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